Título :	L-Asparaginase tipo II de Penicillium cerradense : análises in silico e expressão heteróloga
Otros títulos :	L-Asparaginase type II from Penicillium cerradense : in silico analysis and heterologous expression
Autor :	Andrade, Kellen Cruvinel Rodrigues
Orientador(es)::	Magalhães, Pérola de Oliveira
Assunto::	Leucemia Asparaginase Medicamentos
Fecha de publicación :	12-nov-2024
Data de defesa::	29-sep-2023
Citación :	ANDRADE, Kellen Cruvinel Rodrigues. L-Asparaginase tipo II de Penicillium cerradense: análises in silico e expressão heteróloga. 2023. 145 f., il. Tese (Doutorado em Ciências Farmacêuticas) — Universidade de Brasília, Brasília, 2023.
Abstract:	The enzyme L-asparaginase represents great importance in the pharmaceutical area, being used in the first-line treatment of malignant neoplasms, such as for Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL), due to its ability to hydrolyze L-asparagine into Laspartate and ammonia. Clinical preparations of this enzyme are derived from a prokaryotic source and their use is often associated with severe adverse reactions. Thus, the search for new sources of L-asparaginase is important. The aim of this work was to characterize the biophysical/chemical functions and immunogenic characteristics and to elucidate the molecular structure of L-asparaginase from Penicillium cerradense, and in parallel with the recombinant production of this fungal L-asparaginase in an Escherichia coli expression system. In evolutionary terms, the Lasparaginase from P. cerradense is close to the L-asparaginases from Aspergillus species. Using in silico tools, the enzyme was characterized as a protein fragment of 378 amino acids, with a molecular weight of 39 kDa, with a signal peptide containing 17 amino acids, an isoelectric point of 5.13, an aliphatic index of 97.25 and positive hydropathy (0.256). A structural model was proposed to form a tetramer. This Lasparaginase showed a degree of immunogenicity compatible with clinical use (T and B cell epitopes) in comparison with clinical enzymes from E. coli and Dickeya chrysanthemi and is presented as a non-toxic enzyme. To increase the expression of the enzyme, the sequence was introduced into a pET-28a(+) vector design in E. coli BL21(D3). The L-asparaginase from P. cerradense, without the periplasmic signaling sequence, was cloned and expressed with the formation of typical inclusion bodies. These results present a potentially useful L-asparaginase for clinical use, with knowledge that could lead to strategies to improve the production of the enzyme.
metadata.dc.description.unidade:	Faculdade de Ciências da Saúde (FS) Departamento de Farmácia (FS FAR)
Descripción :	Tese (doutorado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2023.
metadata.dc.description.ppg:	Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas
Licença::	A concessão da licença deste item refere-se ao termo de autorização impresso assinado pelo autor com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade de Brasília e o IBICT a disponibilizar por meio dos sites www.unb.br, www.ibict.br, www.ndltd.org sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra supracitada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, a partir desta data.
Agência financiadora:	Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES).
Aparece en las colecciones:	Teses, dissertações e produtos pós-doutorado

Los ítems de DSpace están protegidos por copyright, con todos los derechos reservados, a menos que se indique lo contrario.