Avaliação das propriedades biológicas de um peptídeo antimicrobiano do anuro Boana albopunctata identificado a partir de banco de cDNAs

Abstract

Peptídeos antimicrobianos (PAMs) são moléculas presentes no sistema imunológico inato de diversos organismos, incluindo plantas, insetos e vertebrados, com ação direta contra microrganismos patogênicos, como bactérias, fungos, protozoários e vírus, além de atuarem também sobre células tumorais. Entre os PAMs de maior interesse estão aqueles isolados da secreção de anuros (sapos, rãs e pererecas), que possuem um amplo espectro de ação e se destacam pelo seu potencial terapêutico. Esses peptídeos, encontrados nas glândulas cutâneas de anuros, atuam por meio de mecanismos que envolvem a interação direta com as membranas celulares dos patógenos, resultando em sua destabilização e morte e também por mecanismos intracelulares atingindo alvos-chave para a viabilidade celular. O potencial terapêutico dos PAMs de anuros é particularmente promissor diante do crescente problema da resistência bacteriana aos antibióticos tradicionais. A capacidade desses peptídeos de atuar de forma eficaz em patógenos resistentes faz deles uma alternativa interessante para o desenvolvimento de novos tratamentos. Além disso, estudos têm explorado suas propriedades imunomoduladoras e cicatrizantes, sugerindo aplicações em doenças infecciosas, na aceleração de processos de cura e em terapias para infecções virais emergentes, como a COVID-19. No presente trabalho, foi sintetizado por síntese química empregando-se a técnica Fmoc, uma raniseptina identificada a partir de uma biblioteca de cDNAs produzida da pele do anuro Boana albopuctata. Tal peptídeo, denominado raniseptina Ba-1, apresentou alta similaridade com as raniseptinas isoladas da espécie Boana raniceps. Em estudos de atividade antimicrobiana, mostrou-se capaz de inibir o crescimento de diversas bactérias patogênicas e de inibir a formação de biofilme da bactéria Pseudomonas aeruginosa. Exibiu efeitos citotóxicos em cultura de macrófagos RAW 264.7 na presença e na ausência de LPS e foi capaz de alterar a taxa de migração de neutrófilos. Em análises por dicroísmo circular, o peptídeo foi capaz de adotar conformação em a-hélice na presença de trifluoretanol e SDS. Em conclusão, a raniseptina Ba-1 exibiu atividade antimicrobiana e conformação em a-hélice, além de efeitos citotóxicos e imunomoduladores em culturas celulares, sugerindo seu potencial terapêutico como agente antimicrobiano.