Análise funcional e proteômica dos polimorfonucleares após Terapia Fotodinâmica (TFD)

Abstract

O câncer é uma das doenças que mais causam mortes no mundo. Em nível global, são cerca de 9,6 milhões de óbitos por ano. O tratamento para essa doença varia entre intervenções individuais ou combinadas, como cirurgias, radioterapia e quimioterapia. Apesar de serem eficazes para alguns tipos de cânceres, esses tratamentos apresentam muitos efeitos colaterais, como náuseas, tonturas e vômitos, além de afetarem o sistema imunitário ao diminuírem leucócitos essenciais, como os neutrófilos, que protegem contra infecções. Devido a essas limitações, a busca por tratamentos mais adequados é constante, e um dos alvos de pesquisa é a Terapia Fotodinâmica (TFD), uma técnica segura, eficaz, minimamente invasiva e menos agressiva que as terapias convencionais. A TFD é composta por três componentes: oxigênio molecular O2, nanopartículas fotossensibilizantes (FS) e luz de comprimento de onda específico. Neste contexto, o presente estudo enfatiza os neutrófilos, células predominantes na resposta imune inata e que participam da fisiopatologia de diversas doenças, incluindo o câncer. Neste estudo, utilizamos a proteômica label-free como ferramenta exploratória para identificar danos deletérios nos neutrófilos, comparando entre os grupos controle, neutrófilos incubados com nanoemulsão de ftalocianina, neutrófilos expostos à luz e o grupo TFD com tratamento completo. Além disso, aprofundamos os testes funcionais. Na análise proteômica, foram identificadas 4.678 proteínas, considerando FDR < 1% e pelo menos dois peptídeos. Em seguida, uma análise de variância simples (one-way ANOVA), realizada pelo programa Progenesis, foi utilizada para a identificação de íons, peptídeos e proteínas com abundância diferencial significativa, resultando na detecção de 107 proteínas reguladas com pelo menos dois peptídeos únicos. A análise proteômica seguida dos testes funcionais possibilitou a observação da ativação dos neutrófilos após o tratamento, além da avaliação de suas capacidades funcionais em processos como fagocitose e migração. Também foi possível observar os tipos de morte celular dos neutrófilos, incluindo apoptose, necrose e netose. O estudo apresentou aspectos fundamentais para a avaliação das funcionalidades dos neutrófilos após a exposição à TFD.