Impacto da ativação do retroelemento LINE-1 na resposta imune durante a infecção por Trypanosoma cruzi

Abstract

A doença de Chagas (DC) é um importante problema de saúde pública, afetando milhões de pessoas na América Latina. Apesar dos avanços em sua compreensão, aspectos fundamentais de sua patogênese ainda não estão totalmente elucidados. Um dos principais enigmas é que suas manifestações clínicas mais severas frequentemente ocorrem na fase crônica da doença, muitas vezes, décadas após a infecção inicial, em um contexto de baixa concentração de parasitos circulantes e de surgimento de respostas autoimunes. Neste estudo, investigamos a influência da ativação de retroelementos LINE-1 (L1) na promoção de respostas pró-inflamatórias e autoimunes durante a infecção por Trypanosoma cruzi. Conduzimos experimentos in vitro para avaliar, por qPCR, a expressão de genes moduladores de L1 e indutores de produção de interferons em células HEK-293, tanto em sua forma competente quanto transfectadas para subexpressao de L1 pelo sistema CRISPR/dCAS-9. Além disso, foram realizados experimentos em modelo murino, incluindo análises de expressão gênica (qPCR), produção de autoanticorpos (ELISA) e inflamação em órgãos específicos (histopatologia). Os resultados obtidos indicam que a infecção por T. cruzi está associada a um aumento progressivo na expressão de L1. Esse aumento está correlacionado com a elevação na expressão de MOV-10, um forte inibidor de L1, em uma provável tentativa de controle do retroelemento. Observou-se também regulação por vias de reparo, com a inativação inicial de L1 mediada por XPA e MSH-2, seguida pela ativação subsequente promovida por ATM. Além disso, houve aumento na expressão de vias de detecção de RNA, como MDA-5 e RIG-1, que ativam a sinalização de interferons, levando à elevação na expressão de IFN-α e IFN-β. Paralelamente, a produção de IFN-γ também foi observada. No modelo murino, verificou-se um aumento na expressão de IFNs e TNF-α, associados à forte ativação de L1 no coração e intestino, órgãos frequentemente afetados pela DC. Esses fatores também se correlacionam com a produção de autoanticorpos, reforçando uma resposta imune relacionada à ativação de L1, independentemente da carga parasitária. Os achados reforçam a hipótese de que a patogênese da DC não se limita à persistência do parasito, mas também envolve mecanismos autoimunes que são ativados pelo patógeno durante a infecção. Esses fatores autoimunes desempenham um papel crucial nas manifestações clínicas tardias da doença, sugerindo que o autorreconhecimento do hospedeiro pode contribuir para a gravidade dos sintomas. Ademais, nossos achados abrem novas possibilidades para identificar alvos terapêuticos que poderiam ser explorados em investigações futuras, potencialmente melhorando a abordagem no tratamento desta complexa patologia.