http://repositorio.unb.br/handle/10482/45731 2026-08-17T22:58:03Z http://repositorio.unb.br/handle/10482/55685 Título: Embriogênese somática em sistema bifásico, respostas ao estresse oxidativo e biobalística em palma de óleo Autor(es): Meira, Rennan Oliveira Resumo: A palma de óleo é uma cultura de grande valor econômico devido ao óleo extraído de seus frutos. A técnica de embriogênese somática tem sido desenvolvida e aprimorada na multiplicação vegetativa dessa espécie, e o cultivo em meio líquido parece ser determinante para contribuir para a produção em larga escala de clones. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivos: 1) desenvolver a embriogênese somática em palma de óleo a partir de sistema bifásico, de modo a aperfeiçoar a multiplicação de agregados celulares e a regeneração de plantas clonais desta espécie; 2) avaliar as respostas ao estresse oxidativo, mediada pela atividade de enzimas antioxidantes de genótipos de palma de óleo (E. guineensis Jacq. var. Pisifera), durante a indução da embriogênese somática e; 3) avaliar a eficiência de um protocolo de transformação genética de calos embriogênicos de palma de óleo, por meio de biobalística. Para tanto, calos foram inicialmente estabelecidos sob cultivos em suspensão, sendo avaliados quanto à multiplicação e crescimento a partir do seccionamento ou dissociação deles em meio de multiplicação específico. O material foi mantido sob agitação constante e, após 90 dias, avaliações referentes ao volume celular sedimentado (VCS) e curva de crescimento foram realizadas. A partir destes materiais multiplicados, experimentos para otimizar a diferenciação e maturação de embriões somáticos foram realizados, avaliandose a porcentagem de oxidação, formação de embriões somáticos (ESs), além do número de plantas regeneradas. Nas respostas ao estresse oxidativo durante a indução da embriogênese somática, explantes foliares oriundos de duas plantas adultas de Elaeis guineensis Jacq. var. Pisifera foram utililizadas. A indução de calos foi realizada em meio de MS suplementado com 450 μM de Picloram, sendo os materiais cultivados por dois subcultivos de 45 dias cada. Aos 90 dias de indução foram avaliadas as percentagens de formação de calo e oxidação dos explantes, além da percentagem de contaminação dos materiais. Para as análises bioquímicas e enzimáticas, amostras de ambos os genótipos foram coletadas aos 7, 15, 30, 90 e 180 dias após o início do cultivo, sendo analisadas as proteínas solúveis totais e a atividade das enzimas peroxidase (POD), catalase (CAT) e ascorbato peroxidase (APx). Com relação ao processo de transformação genética de palma de óleo, os experimentos foram realizados utilizando-se o plasmídeo pMONORNAiBAR-FAD. O processo utilizado para a transformação de calos embriogênicos foi por biobalística e o agente de seleção utilizado foi o glufosinato de amônio (4 mg.L-1 ). Os resultados indicaram alta eficiência no processo de estabelecimento e multiplicação de agregados celulares em meio líquido, embora não tenha sido observado diferenças significativas na multiplicação dos materiais em razão de se usar a forma de dissociação ou seccionamento dos calos em cultivo. Na fase de diferenciação de ESs, o tratamento com ½MS + 20 g.L-1 de sacarose + 0,50 g.L-1 de glutamina + 1,5 g.L-1 de carvão ativado + 2,3 g.L-1 de Phytagel® foi o que proporcionou os melhores resultados quanto à porcentagem de formação de embriões somáticos (46% dos calos), taxa de germinação de ESs e plantas formadas. Quanto avaliou-se as respostas ao estresse oxidativo durante a indução, verificou-se genótipo-dependência nos resultados, com um dos genótipos não apresentando formação de calos. Os teores de proteínas solúveis totais mostraram-se estatisticamente diferentes entre os genótipos, embora o mais responsivo tenha sido o que apresentou os maiores valores para a enzima POD. A atividade das enzimas CAT e APx não apresentou o mesmo comportamento que a POD, com níveis altos apenas aos 180 dias para o genótipo não responsivo. Por fim, no experimento de transformação genética obtiveram-se 21 plantas regeneradas nos diversos tratamentos de transformação. No entanto, em nenhum dos regenerantes foi possível detectar eventos de transformação. Informações adicionais: Tese (doutorado) — Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2023. 2026-08-17T00:00:00Z http://repositorio.unb.br/handle/10482/55682 Título: Identificação de regiões genômicas seguras para aplicações de biologia sintética Autor(es): Leitão, Matheus de Castro Resumo: Desde o início da engenharia genética, a inserção de genes exógenos em células hospedeiras apresentou desafios, seja pelo aumento do tamanho das inserções, seja pelo desafio de direcionamento preciso para integração em regiões do genoma permissivas para transcrição. Com o advento da Biologia Sintética, há um aumento da complexidade para a inserção, não apenas de um gene, mas de diversos genes componentes de vias metabólicas e circuitos genéticos, além da necessidade de estudos mais refinados de organização, estruturação e regulação genômica. A fim de evitar integração aleatória no genoma que possa gerar expressões instáveis ou fenótipos imprevisíveis, é demandada integração específica sem modificação da expressão de genes endógenos codificadores de proteínas essenciais. Uma abordagem comum é direcionar as inserções para regiões intragênicas ou intergênicas capazes de acomodar a expressão esperada do inserto sem alterações adversas ao hospedeiro, denominadas Porto Genômico Seguro (do inglês, Genomic Safe Harbor, GSH). GSHs foram encontrados em humanos, camundongos, macacos e Cryptococcus, porém em sua maioria estão em regiões com alta densidade gênica e no caso de humanos próximos a genes relacionados ao câncer. Com o objetivo de expandir o número de GSHs disponíveis em diferentes organismos, a presente proposta visou o desenvolvimento de um programa de computador de identificação de prováveis GSHs com uma abordagem otimizada seguindo critérios definidos para refinar a busca por novas regiões extragênicas de inserção em três organismos eucarióticos: Homo sapiens, Mus musculus e Saccharomyces cerevisiae. Esse software, SHIP (do inglês, Safe Harbor Identification Program), foi desenvolvido na linguagem Python e utilizou como entrada arquivos de anotação gênica do organismo estudado aliado a informações de características regulatórias de expressão gênica, como potencial de metilação do DNA, locais de ligação de fator de transcrição e sítios de alterações de histonas, identificando 6 pGSHs (GSHs putativos) em S. cerevisiae, 16 em H. sapiens e 11 em M. musculus. Adicionalmente, essa proposta validou in vivo 5 GSHs identificados pelo software SHIP no organismo modelo S. cerevisiae. Desta maneira, o software SHIP é o primeiro algoritmo, disponível e validado experimentalmente, capaz de identificar pGSHs em qualquer organismo Eucarioto com anotação genômica. Informações adicionais: Dissertação (mestrado) — Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2024. 2026-08-17T00:00:00Z http://repositorio.unb.br/handle/10482/55668 Título: “Esperançar e Criar Vida”: Histórias, aprendizados e ensinamentos de Dona Flor Autor(es): Wulff, Clara Nabuco Da Fonseca Resumo: A minha proposta aqui é a de desenhar a memória de Dona Flor, através das histórias que ela me contou, ou que contou a terceiros que gentilmente as compartilharam comigo, bem como a apreender a sua prática cotidiana a partir do encontro etnográfico. Nesse sentido, construo a memória de ter convivido com Dona Flor e de quem conviveu com ela, que passa por mim de múltiplas formas e me liga a grandiosidade dessa mulher As narrativas sobre Dona Flor, que ela contou e outras pessoas contaram, assim como a experiência de ter convivido com ela e aprendido sobre práticas de cuidado são o eixo central do trabalho, raiz pivotante que atravessa o tempo, tendo como coifa1 a convivência em lugares como a casa e pessoas, como seus filhos e aprendizes, que sintetizam, alimentam e promovem sua prática e história, o passado e o presente. Dessa raiz pivotante saem ramos secundários, eixos de análise teórica que firmam-na no chão, espalhando-a, nutrindo-a com ideias que se relacionam mais na extremidade do encontro entre ela, Dona Flor, sua história e prática, e eu, antropóloga, aprendiz, mulher e aliada. Informações adicionais: Dissertação (Mestrado) — Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Sociais, Departamento de Antropologia, Programa de Pós-Graduação em Antropologia Social, 2025. 2025-01-06T00:00:00Z http://repositorio.unb.br/handle/10482/55667 Título: “Esperançar e criar vida” : histórias, aprendizados e ensinamentos de Dona Flor Autor(es): Wulff, Clara Nabuco Da Fonseca Resumo: A minha proposta aqui é a de desenhar a memória de Dona Flor, através das histórias que ela me contou, ou que contou a terceiros que gentilmente as compartilharam comigo, bem como a apreender a sua prática cotidiana a partir do encontro etnográfico. Nesse sentido, construo a memória de ter convivido com Dona Flor e de quem conviveu com ela, que passa por mim de múltiplas formas e me liga a grandiosidade dessa mulher As narrativas sobre Dona Flor, que ela contou e outras pessoas contaram, assim como a experiência de ter convivido com ela e aprendido sobre práticas de cuidado são o eixo central do trabalho, raiz pivotante que atravessa o tempo, tendo como coifa1 a convivência em lugares como a casa e pessoas, como seus filhos e aprendizes, que sintetizam, alimentam e promovem sua prática e história, o passado e o presente. Dessa raiz pivotante saem ramos secundários, eixos de análise teórica que firmam-na no chão, espalhando-a, nutrindo-a com ideias que se relacionam mais na extremidade do encontro entre ela, Dona Flor, sua história e prática, e eu, antropóloga, aprendiz, mulher e aliada. Informações adicionais: Dissertação (Mestrado) — Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Sociais, Departamento de Antropologia, Programa de Pós-Graduação em Antropologia Social, 2025. 2025-01-06T00:00:00Z